一文帶你快速了解恒溫熒光擴增儀的原理
更新時間:2022-05-25 點擊量:1314
恒溫熒光擴增儀主要是用來定量分析和確定基因轉(zhuǎn)錄水平的節點,而普通基因擴增儀是做定性分析和擴增基因片段,熒光定量基因擴增儀可以做普通基因擴增儀的工作要求,而反之就不行了用上了,況且這樣代價太大了,一般的實驗室都不允許這樣做的適應性強〉奶匦??傊畠烧叩墓δ懿荒芑ハ嗳〈?div> 普通基因擴增儀只能夠定性地分析是否存在目標片段能力建設。但是價格要低很多高效,而且運行成本也要低很多。不過不能直接得到擴增結果基礎,還需要做電泳檢測領域。實際中檢測遺傳疾病,品種分子標記篩選要素配置改革,甚至親自鑒定等都可以由普通基因擴增儀完成。
但是,某些需要定量的實驗就必須用到實時定量基因擴增儀了無障礙。比如檢測某些病原物的數(shù)量(血液乙肝病毒復制程度)體系,特定基因的表達量(比如結合反轉(zhuǎn)錄做的RNA定量分析),某些基因在染色體組中拷貝數(shù)等等。熒光定量基因擴增儀一般不需要對擴增產(chǎn)物進行電泳分析註入新的動力,操作相對簡單些互動互補,但是耗材實在是貴。
簡單來說自主研發,普通基因擴增儀只能擴增力度,不能檢測,便宜意向。熒光定量基因擴增儀除了擴增持續發展,還能在擴增的同時檢測DNA發(fā)出的熒光信號,試劑和儀器都更貴系統性。
恒溫熒光擴增儀原理:
標記有熒光素的TaqMan探針與模板DNA混合后合作,完成高溫變性,低溫復性損耗,適溫延伸的熱循環(huán)勇探新路,并遵守聚合酶鏈反應規(guī)律,與模板DNA互補配對的TaqMan探針被切斷形式,熒光素游離于反應體系中擴大,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加深入交流,被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長解決,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得CT值動力,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照不斷豐富,即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。